两栖动物大蹼铃蟾皮肤分泌液细胞外囊泡的蛋白质组成

Protein composition of extracellular vesicles from skin secretions of the amphibian Bombina maxima

摘要: 细胞外囊泡（Extracellular vesicles, EVs）在生物体内活性物质的运输和细胞间通讯中起着重要的作用。两栖动物皮肤作为暴露在空气中的黏膜，参与许多重要的生理过程。然而，我们对两栖动物皮肤中的细胞外囊泡却知之甚少。该研究中，我们以大蹼铃蟾（Bombina maxima）为研究模型，成功地从其皮肤分泌液中分离出EVs，并通过纳米颗粒跟踪分析、免疫印迹和电子显微镜对这些EVs进行了鉴定。然后通过液相色谱-质谱串联的蛋白质组学分析，我们在皮肤分泌液EVs中鉴定出131个蛋白，并根据其生物学过程或分子功能发现了大量与免疫应激、代谢、氧化还原和转运相关的蛋白。同时，我们也对皮肤分泌液中non-EV （大蹼铃蟾皮肤分泌液中除EV外的蛋白质）的蛋白质组进行了分析，在non-EVs样本中鉴定出了313种蛋白质。EVs和non-EV蛋白质组比较分析发现，EVs特有的蛋白有62个，non-EVs特有的蛋白有244个，而EVs和non-EVs共有的蛋白有69个。流式细胞分析结果显示，分离的EVs可被大蹼铃蟾皮肤来源成纤维细胞摄取。该研究为两栖动物皮肤中存在包含大量生物活性物质的EVs提供了证据，提示EVs在两栖动物皮肤中发挥着重要的生理功能。